二氧化氯和过氧乙酸对矿泉水卫生指标菌杀灭效果的观察

发表时间:2019-07-10 21:57作者:雅洁来源:天津雅洁科技有限公司网址:http://www.tjeryanghualv.com
文章附图

IMG_2255.jpg跟着天然矿泉水日渐成为人们日常饮用水的主要来历,矿泉水的安全问题遭到了越来越多的关注。新的《饮用天然矿泉水》国家标准[1]已于2009年10月1日正式施行,其间的微生物目标增加了铜绿假单胞菌、粪链球菌和产气荚膜梭菌三项致病菌的检测,而取消了细菌总数,其意图在于着重产品的微生物安全,与国际标准接轨。

二氧化氯具有很强的氧化作用,而且它不会发生氯的代替反应,因而不会发生致癌、致畸变的有机氯代产品,被联合国卫生组织(WHO)列为A1级安全消毒剂[2]。过氧乙酸则是一种用途广泛的酸性氧化型消毒剂,可用于一般物体外表和食物加工机械管道、东西、包装物、餐具及环境消毒,并在多个范畴得到了广泛的推广应用[3]。因而,矿泉水出产企业常将二氧化氯和过氧乙酸消毒液用于回收桶的消毒。

研讨标明[4~5],在我国天然矿泉水的水源中,铜绿假单胞菌的阳性率约为20%~25%;而粪链球菌和产气荚膜梭菌也是水源污染的指示菌。因而,在出产过程中,因为交叉污染等一些原因,回收桶也可能带有这些致病菌。本文的意图旨在研讨二氧化氯和过氧乙酸对这三种矿泉水卫生目标菌的杀灭作用,从而为实际出产中两种消毒剂的消毒浓度和时刻提供参考,避免因为消毒不彻底而造成卫生安全事故。

1 资料与办法

1.1 消毒剂的制造

实验所用的稳定性二氧化氯和过氧乙酸消毒液均由广东环凯微生物科技有限公司提供。稳定性二氧化氯为二元制剂,按消毒剂:活化剂=10:1(v/v)活化10 min后,按五步碘量法[6]对二氧化氯的有用含量进行测定,然后稀释到所需求的浓度备用。过氧乙酸消毒液为一元制剂,按直接碘量法[7](GB/T 19104-2006)对过氧乙酸的有用含量进行测定,然后稀释到所需求的浓度备用。

1.2 菌悬液制备

实验菌为铜绿假单胞菌(ATCC 15442),粪链球菌(ATCC 25912)和产气荚膜梭菌(ATCC 13124)。铜绿假单胞菌和粪链球菌取养分琼脂培育基斜面新鲜培育物(18~24 h),用磷酸盐缓冲液(PBS)洗下斜面上菌苔,并稀释制造成实验浓度菌悬液。产气荚膜梭菌直接取疱肉肉汤培育基中的新鲜培育物(18~24 h),用PBS稀释制造成实验浓度菌悬液。

1.3 中和剂断定实验

实验菌为铜绿假单胞菌、粪链球菌、产气荚膜梭菌,实验设6组,按照《消毒技术规范》(2002版)[8]中规则的中和剂断定实验程序进行实验和成果断定。

1.4 悬液定量灭菌实验

实验在20 ℃水浴条件下进行。按照《消毒技术规范》(2002版)中的悬液定量灭菌实验办法,在灭菌大试管中参加0.5 mL菌悬液,再参加0.5 mL有机干扰物质(3%牛血清白蛋白),混匀。参加4.0 mL相应浓度的消毒剂,作用至预定时刻。取菌药混合物0.5 mL至4.5 mL中和剂试管内,混匀,中和10 min。梯度稀释,取1.0 mL接种无菌平皿,倾泻琼脂培育基并混匀。其间,铜绿假单胞菌和粪链球菌选用胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)培育基,产气荚膜梭菌选用亚硫酸盐多粘菌素磺胺嘧啶琼脂根底(SPS根底)培育基。待培育基凝固后,铜绿假单胞菌和粪链球菌于37 ℃培育48 h,产气荚膜梭菌于37 ℃厌氧培育48 h,观察成果。计数平板菌落数,核算杀灭率。实验重复3次。

2 成果

2.1 中和剂断定实验成果

以三种实验菌株为代表的中和剂断定实验成果标明,用含2 g/L硫代硫酸钠+3 g/L卵磷脂+10 g/L吐温80的PBS溶液组成的中和剂,可有用中和实验浓度二氧化氯和过氧乙酸消毒剂的残余作用,中和剂和中和产品对实验菌及培育基均无影响。

2.2 悬液定量灭菌实验成果

不同浓度二氧化氯和过氧乙酸对铜绿假单胞菌、粪链球菌、产气荚膜梭菌的杀灭作用不同,实验标明,二氧化氯对铜绿假单胞菌、粪链球菌和产气荚膜梭菌杀灭率到达100%的条件分别为50 mg/L、1 min(成果在表1中未列出),35 mg/L、3 min和35 mg/L、3 min。而过氧乙酸消毒液100 mg/L作用3 min或许200 mg/L作用1 min对三种致病菌均能杀灭率达100%。

3 讨论

二氧化氯和过氧乙酸属于氧化型消毒剂,他们具有广谱高效,快速杀灭各种微生物的特点。从实验成果来看,这两种对矿泉水卫生目标新增的三种致病菌具有杰出的灭菌作用,在较低浓度和较短时刻内能有用杀灭这些微生物。但是,一般以为,二氧化氯的灭菌作用受有机物的影响非常显着,但这样可能与有机物的类型和浓度有关[3]。同样地,过氧乙酸的灭菌作用也或多或少遭到有机物的影响。因而,在实际使用过程中,在桶装饮用水出产过程中,对回收桶进行消毒前有必要进行有用的清洗,以降低有机物的含量,从而确保消毒作用。

铜绿假单胞菌在许多水源水中能被检出,而且它极易发生耐药性,其发生耐药性的机理很复杂,已经成为研讨微生物耐药性的形式菌种。从实验成果来看,铜绿假单胞菌对二氧化氯和过氧乙酸的反抗力也较粪链球菌和产气荚膜梭菌要强。因而,在出产过程中,应加强对铜绿假单胞菌的检测。

产气荚膜梭菌为能发生芽孢的食源性致病菌,其孢子在水中的时刻存活较大肠菌群长得多,并能反抗消毒剂。因为产气荚膜梭菌孢子存活时刻长,最适宜用作断续污染和长时间污染的目标。因而,研讨二氧化氯消毒剂对产气荚膜梭菌孢子的杀灭作用更具有实际意义。

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